Controllo della Legionella: aspetti da considerare per il rilevamento secondo la norma ISO 11731:2017
16 de Luglio de 2025La prevenzione e il controllo della Legionella rappresentano una sfida prioritaria per la salute pubblica, in particolare negli impianti in cui l’acqua può diventare un vettore di trasmissione. L’applicazione corretta di metodi standardizzati e l’utilizzo di materiali adeguati sono fondamentali per garantire la sicurezza e la conformità normativa.
Che cos’è la Legionella e perché rappresenta un rischio?
La Legionella è un genere di batteri ambientali che vive in ambienti acquatici. La sua specie più pericolosa, L. pneumophila, è responsabile del 70 % dei casi di legionellosi, una patologia che può manifestarsi come una grave forma di polmonite (Malattia del Legionario) o come una condizione lieve simile all’influenza (Febbre di Pontiac).
Il batterio prolifera in impianti con acqua stagnate, temperature comprese tra 20 e 45 °C, e in presenza di biofilm e nutrienti. La sua trasmissione non avviene attraverso il consumo diretto di acqua, ma per inalazione di aerosol contaminati.
Un quadro normativo sempre più rigoroso
La normativa vigente impone controlli rigorosi e piani preventivi documentati. Tra i principali riferimenti normativi in Italia si trovano:
D. Lgs. 18/2023 e Accordo Stato-Regioni del 07/05/2015, che regolano la prevenzione della legionellosi in Italia.
UNI EN ISO 11731:2017, norma internazionale di riferimento per il conteggio della Legionella nelle acque.
Altre norme come UNI EN 13623:2011 e UNI EN ISO 19458:2006, che integrano i criteri relativi a qualità, disinfezione e campionamento.
Aspetti da considerare secondo la norma ISO 11731 per il controllo della Legionella
La norma ISO 11731 definisce i metodi di riferimento per l’analisi microbiologica della Legionella spp.. Le fasi chiave includono:
1. Prelievo dei campioni
Contenitori sterili con tiosolfato per neutralizzare i biocidi (≥18 mg/l o 120 mg/l in caso di alta concentrazione di cloro).
Misurazione in situ di pH, temperatura e conducibilità.
Trasporto refrigerato (5 ± 3 °C) e analisi entro 24‑48 ore.
2. Concentrazione del campione
Filtrazione con eluizione (filtri in policarbonato o PES, 0,2 µm).
Filtrazione con posizionamento diretto della membrana sul terreno di coltura (filtri in cellulosa, 0,2–0,45 µm).
Alternativa: centrifugazione, se la filtrazione non è praticabile.
3. Pretrattamento
Termico: 50 ± 1 °C per 30 minuti.
Acido: con tampone acido a pH 2,2 per 5 minuti.
4. Terreni di coltura
BCYE: terreno per la coltivazione standard della Legionella.
GVPC, MWY o BCYE + AB: terreni selettivi.
BCYE senza cisteina: terreno per la conferma.
5. Incubazione e lettura
Incubazione a 36 ± 2 °C per 7–10 giorni in ambiente umido.
Esame da effettuare al 2°, 3°, 4° e 5° giorno.
Colonie bianco-grigiastre, aspetto vitreo e autofluorescenti sotto UV.
6. Conferma
Rinsemina su BCYE e BCYE‑cys.
Identificazione mediante test al lattice o immunofluorescenza.
Prodotti Scharlab per un’analisi affidabile
In Scharlab offriamo una gamma completa di prodotti per eseguire l’analisi secondo la norma ISO 11731:
Flaconi per il prelievo con e senza tiosolfato.
Filtri a membrana (PES, PC o NC).
Terreni di coltura BCYE, GVPC, MWY…
Soluzioni tampone e diluenti.
Ceppi di controllo MiStraCon®Swabs2 con certificazione ATCC®.
Attrezzature: incubatrici, bagni termostatici, vortex, cappe di sicurezza biologica, stereomicroscopi, ecc.
Tabella di decisione: Norma ISO 11731:2017
La scelta di un metodo piuttosto che un altro deve essere effettuata seguendo una matrice decisionale descritta nell’Appendice J della norma.
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